近期有朋友反映K7M2這個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)過程中形態(tài)呈現(xiàn)出細(xì)胞觸角多、拉絲的特點(diǎn)，那這到底是不是正常生長(zhǎng)形態(tài)呢？今天我們來了解下這個(gè)細(xì)胞正常生長(zhǎng)形態(tài)及相關(guān)要點(diǎn)。

▲  基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM,high glucose(CellCook:CM2016或Gibco cat:11995,或同配方)

▲  血 清： 南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)

▲  傳代方法：1:2-1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

▲  傳代方式：消化2-3分鐘

▲  換液頻率：2~3天換液1次

▲ 凍存液配方：DMEM,high glucose+10%FBS+          1 0%DMSO

       ▲  難度等級(jí)：++

       ▲  特征特性：抗原表達(dá):CD31陽性；產(chǎn)物:八因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglyan、decorrin、villin2(ezrin)。骨唾液酸蛋白,biglyan,decorrin和osteopontin的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特性。

▲ 1、該細(xì)胞有密度依賴，密度低時(shí)生長(zhǎng)緩慢，需注意細(xì)胞培養(yǎng)密度，保證培養(yǎng)效果。

▲ 2、細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)注意“快融”原則，宜一分鐘內(nèi)全部溶解。

▲ 3、配制凍存液時(shí)注意DMSO配制時(shí)會(huì)發(fā)熱易灼傷細(xì)胞，所以需等凍存液冷卻后再使用。

▲  4、傳代消化時(shí)一般消化2-3min，消化時(shí)間可根據(jù)細(xì)胞消化程度進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，注意勿消化過度。

▲ 5、該細(xì)胞對(duì)外界刺激較敏感，建議培養(yǎng)時(shí)使用新鮮DMEM高糖培養(yǎng)基，注意培養(yǎng)基顏色變化，如變紫需及時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基。