圖1：BCRC中H9C2細(xì)胞形態(tài)

■ H9C2細(xì)胞由KIMES B和BRANDT B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆得到；表現(xiàn)出許多骨骼肌的特性。

■ 這個(gè)細(xì)胞株中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管，并對(duì)乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。

■ 如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，融合很快發(fā)生。

本文為大家介紹H9C2的培養(yǎng)條件及注意事項(xiàng)

圖2：賽庫(kù)H9C2細(xì)胞形態(tài)

一、培養(yǎng)條件

■ 生長(zhǎng)特性：貼壁

■ 形態(tài)特征：成纖維細(xì)胞樣

■ 培養(yǎng)條件：DMEM(改良型) +10%胎牛血清(進(jìn)口南美級(jí)別）

■ 傳代比例：1:3傳代（培養(yǎng)面積比）

■ 傳代方式：消化1分30秒

■ 換液頻率：2~3天換液1次

■ 凍存液配方：DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO

■ 培養(yǎng)要點(diǎn)：建議使用改良型DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)

二、常見(jiàn)問(wèn)題

01 為什么會(huì)出現(xiàn)空泡？

可能是鋪板時(shí)鋪得不夠均勻，局部過(guò)于密集，密集地方的細(xì)胞狀態(tài)會(huì)變差、空泡增多。也可能是血清品質(zhì)較差，要更換優(yōu)質(zhì)血清，及時(shí)換液

02 為什么細(xì)胞長(zhǎng)得慢？

細(xì)胞密度低或細(xì)胞鋪得不均勻，細(xì)胞長(zhǎng)不起來(lái)，可以先培養(yǎng)，然后消化重新種瓶，提高密度培養(yǎng)或直接重新消化接種培養(yǎng)。

操作時(shí)力度沒(méi)控制好，力度過(guò)大將細(xì)胞吹碎，狀態(tài)變差。

血清品質(zhì)較差，影響細(xì)胞生長(zhǎng)，建議更換高品質(zhì)血清。

03 H9C2細(xì)胞狀態(tài)差，容易漂？

可能是血清問(wèn)題，建議換高品質(zhì)血清，并注意血清要程序解凍，不能水浴化開(kāi)；

也有可能是細(xì)胞沒(méi)鋪勻，局部生長(zhǎng)密集，需要及時(shí)傳代，并不是細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)才傳代，當(dāng)有個(gè)別地方長(zhǎng)得過(guò)于密集，容易疊加的時(shí)候應(yīng)該就要傳代了。

參考文獻(xiàn)

[1] Li Y, Fu L, Zhang J, et al. CircularRNA circ_0071269 knockdown protects against from diabetic cardiomyopathy injury by microRNA-145/gasdermin A axis[J]. Bioengineered, 2022, 13(2):2398-2411.

DOI:10.1080/21655979.2021.2024688

[2] Liu X, Wang M, Li Q, et al. CircRNA ACAP2 induces myocardial apoptosis after myocardial infarction by sponging miR-29[J]. Minerva Medica, 2020.

DOI:10.23736/S0026-4806.20.06600-8

[3] Sun L, Wang H, Xu D, et al. Lapatinib induces mitochondrial dysfunction to enhance oxidative stress and ferroptosis in doxorubicin-induced cardiomyocytes via inhibition of PI3K/AKT signaling pathway[J]. Bioengineered, 2021, 13(1).

DOI:10.1080/21655979.2021.2004980

[4] Wen Z, Mai Z, Zhu X, et al. Mesenchymal stem cell-derived exosomes ameliorate cardiomyocyte apoptosis in hypoxic conditions through microRNA144 by targeting the PTEN/AKT pathway[J]. Stem Cell Research & Therapy, 2020, 11(1).

DOI：10.1186/s13287-020-1563-8 (此文獻(xiàn)H9C2細(xì)胞購(gòu)自賽庫(kù)生物）