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一、真菌概述
真菌是一類具真核和細(xì)胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過(guò)孢子延續(xù)種群,典型的營(yíng)養(yǎng)體為絲狀分支結(jié)構(gòu)。可污染細(xì)胞培養(yǎng)基的真菌種類繁多,最常見的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。
二、真菌污染


真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中最常見的另一種污染,尤其在梅雨季節(jié),霉菌污染尤為嚴(yán)重。另外由于真菌可以通過(guò)孢子繁殖,因此一旦污染很容易發(fā)生擴(kuò)散。常見的真菌感染有煙曲霉菌、黑曲霉菌、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌污染等。


特點(diǎn)

1

真菌污染的細(xì)胞培養(yǎng)基短期內(nèi)一般不會(huì)渾濁,可在培養(yǎng)液表面形成白色或黃色漂浮物(斑點(diǎn)狀,易于觀察);
2

高倍鏡下可見明顯的絲狀、管狀或是樹枝狀的菌絲縱橫交錯(cuò)在細(xì)胞間;
3

念珠菌和酵母菌污染一般會(huì)成卵圓形散在細(xì)胞周邊,并且酵母菌污染會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液渾濁。
4

真菌污染會(huì)與細(xì)胞搶奪營(yíng)養(yǎng),還會(huì)釋放次級(jí)代謝物毒害細(xì)胞,造成細(xì)胞活力變差,生長(zhǎng)速度變慢,甚至死亡。

酵母污染
鏡下可以看到典型的出芽形態(tài)

真菌污染防治方法

如果細(xì)胞被真菌污染,建議丟棄,重新復(fù)蘇,以防污染其他細(xì)胞。
如果細(xì)胞很珍貴,可使用兩性霉素B或者300ug/mL的氟康唑處理。

注意
1
發(fā)生真菌污染后,將其他細(xì)胞移出培養(yǎng)箱,用微量硫酸銅溶液擦拭培養(yǎng)箱,再把水盤里加適量硫酸銅或者磷酸氫二鈉高鹽液體。
2
細(xì)胞培養(yǎng)箱應(yīng)定期清潔,大約一個(gè)月左右清潔一次。
3
最主要的還是要培養(yǎng)良好的無(wú)菌觀念,實(shí)驗(yàn)室盡量不要大聲說(shuō)話,佩戴好口罩,手套,操作時(shí)應(yīng)小心,避免培養(yǎng)基撒入培養(yǎng)箱以及生物安全柜,這些撒入培養(yǎng)箱的培養(yǎng)基為細(xì)菌及真菌的繁殖提供了很好的條件。
























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