Hep G2人肝癌細胞。該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、Α-2-巨球蛋白、Α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、Α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、Α-1酸性糖蛋白、Α-2-HS-糖蛋白、Β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白；表達胰島素受體和胰島素樣生長，適合用于肝細胞代謝方面的研究。
圖一：ATCC中Hep G2細胞形態(tài)
本文為大家介紹Hep G2生長特性和常見問題解決策略。
生長特性
上皮樣呈片狀的小島形態(tài)，容易抱團聚集疊加生長：
圖二：Hep G2細胞
圖三：Hep G2細胞
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)體系
MEM+10%胎牛血清（南美級別）+添加劑:1X 非必需氨基酸。
傳代比例
1:4傳代（培養(yǎng)面積比）。
傳代方式
0.25%胰酶消化5分鐘。
換液頻次
每周換液兩次。
倍增時間
25.65 小時（PubMed= 31378681); 50-60 小時 (DSMZ)。
凍存液配方
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO。
培養(yǎng)要點
細胞有堆疊生長特性，消化后需兩天貼壁至完全攤開；生長較慢。
常見問題
01 疊加生長
Hep G2細胞生長特性是緊密連接成片狀從四周延展增殖，形成一座座的小島狀，細胞在增殖過程中可能會看到輕微的細胞堆積點，屬于正常現(xiàn)象，所以消化所需時間較久，注意觀察，等待細胞自然脫落即可，切勿拍打培養(yǎng)瓶或過度吹打細胞，避免細胞損傷。
01 貼壁慢、漂浮細胞多
Hep G2細胞傳代后會有許多簇狀仍處于懸浮狀態(tài)，這是正常現(xiàn)象，一般2-3天內(nèi)會緩慢粘附于培養(yǎng)瓶緩慢延伸進行增殖。建議傳代后2天內(nèi)減少觀察和移動細胞。
當(dāng)凍存細胞進行復(fù)蘇時，通常會出現(xiàn)大量漂浮細胞不貼壁，屬于正常情況，剛復(fù)蘇的細胞比較脆弱，建議3 天不要干擾，如果3天后漂浮細胞還很多，且漂浮細胞透亮圓潤，可以重新收集細胞1000rmp、離心5分鐘接種到新的培養(yǎng)瓶。
注
必要時可以提高血清濃度至15%輔助細胞更快貼壁增殖
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