提到細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，最基礎(chǔ)的恐怕就是seeding cells了吧，把用于實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞鋪的均勻且密度適宜，不僅在看起來(lái)賞心悅目，更是決定了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
從10cm dish到96孔板，難度逐步增加~ ~ 在這里我以293T細(xì)胞為例。
均勻接種通關(guān)手冊(cè)
NO.1
10cm dish
均勻接種
通關(guān)秘籍：
1、dish緊貼，緊貼你的實(shí)驗(yàn)臺(tái)；前前后后，左左右右晃起來(lái)；
前后前后前后前后左右左右左右
2、10cm dish可以晃得慢一點(diǎn)，想象你的手里dish中不是培養(yǎng)基，而是，海浪！~~~~~~
輕柔且緩慢，10次重復(fù)即可。
記得顯微鏡下觀察哦，推薦4x物鏡~~~，不滿意就再加一個(gè)循環(huán)，切記請(qǐng)勿用力過(guò)猛將液體灑出來(lái)喲。
NO.2
6cm dish
均勻接種
通關(guān)秘籍：
1、參照10cm dish，速度加1擋；比如說(shuō)之前你一個(gè)前后左右要2s，現(xiàn)在換成1s。
記得顯微鏡下觀察哦，推薦4x物鏡~~~，不滿意就再加一個(gè)循環(huán)，切記請(qǐng)勿用力過(guò)猛將液體灑出來(lái)喲。
NO.3
3.5cm dish/6孔板
均勻接種
通關(guān)秘籍：
1、3.5cm dish和6孔板的一個(gè)孔在規(guī)格上是一樣的，可以將前后左右的幅度再大一些，比如6cm dish你的一個(gè)前后跨度5cm，現(xiàn)在換成10cm，速度加檔相比6cm dish加0.5檔。
記得顯微鏡下觀察哦，推薦4x物鏡~~~，不滿意就再加一個(gè)循環(huán)，切記請(qǐng)勿用力過(guò)猛將液體灑出來(lái)喲。
NO.4
12孔板-24孔板
均勻接種
通關(guān)秘籍：
1、再劇烈一點(diǎn)，切記請(qǐng)勿用力過(guò)猛將液體灑出來(lái)喲。
NO.5
48孔板
均勻接種
通關(guān)秘籍：
1、一般到48孔板就不推薦上下左右了，不是說(shuō)這種方法不行，而是不太好操作，得稍微老一點(diǎn)的手。
推薦使用以下兩種方法中的一個(gè)或聯(lián)合使用：
輕拍孔板邊緣！加入200-500μL左右細(xì)胞懸液，左手或右手水平持板，沿著4條邊 依次輕拍數(shù)下，不要拘泥于拍順序和位置，以鏡下均勻?yàn)闇?zhǔn)。
預(yù)加培養(yǎng)基，再滴加細(xì)胞懸液！若是你想要每孔盛500μL media，你可以先放4/5的media，也就是400μL，再把你要的細(xì)胞懸浮成100μL，使用移液槍，垂直于平板緩慢滴加到板中央即可，只要夠垂直和居中，一般不需要搖晃或者拍板就可以非常均勻。
NO.6
96孔板
均勻接種
1、到96孔不建議搖晃和拍板，不是說(shuō)不行，難度比較大了。
接種數(shù)目通關(guān)手冊(cè)
接種數(shù)目
接種數(shù)目以293T細(xì)胞為例：
【1】10cm：300-500萬(wàn)；相當(dāng)于10cm dish 80%匯合時(shí)1:4或1:5傳代的效果；
【2】6cm：120-200萬(wàn)；其底面積為10cm的1/2.5；
【3】3.5cm/6孔板：60-80萬(wàn)；
【4】12孔板：20-30萬(wàn)；
【5】24孔板：10-15萬(wàn)；
【6】48孔板：5-8萬(wàn)；
【7】96孔板：3-5萬(wàn)。
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