DMEM,high glucose(CellCook cat:CM2016,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

消化30秒

2~3天換液1次

DMEM,high glucose+10%FBS+10%DMSO

293細(xì)胞中轉(zhuǎn)入SV40T-antigen基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株，即為293T細(xì)胞系。這使得包含SV40ori的質(zhì)粒能夠在該細(xì)胞系中顯著擴(kuò)增，從而促進(jìn)表達(dá)載體的擴(kuò)增，促進(jìn)蛋白的表達(dá)。293T細(xì)胞除了可用于各類基因表達(dá)及蛋白生產(chǎn)，還可用于高滴度逆轉(zhuǎn)錄病毒及其他病毒生產(chǎn)，如腺病毒及其他哺乳動(dòng)物病毒。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察，標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個(gè)月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。