F-12K(CellCook cat:CM2004,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:2傳代（培養(yǎng)面積比）

消化3分30秒

2~3天換液1次

F-12K+10%FBS+10%DMSO

特征特性：該細(xì)胞系是過表達(dá)luciferase基因的順鉑耐藥A549細(xì)胞株。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合進順鉑耐藥細(xì)胞基因組，使耐藥細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強細(xì)胞熒光表達(dá)量可進行抗性篩選。順鉑耐藥熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個月，篩選時，可將嘌呤霉素和順鉑直接添加到培養(yǎng)基中，交替使用嘌呤霉素和順鉑傳代培養(yǎng)藥篩更佳，每次篩選時間為1-2周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL，順鉑終濃度為2μg/ml。長期凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時，可進行篩選，維持陽性細(xì)胞比例。篩選過程中，建議不要使用細(xì)胞做實驗，抗生素會影響部分實驗結(jié)果。