RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:2傳代（培養(yǎng)面積比）

消化2-3分鐘

2~3天換液1次

RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO

從一名接受了初期放療的患者的肺淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中分離建系。 細(xì)胞具有純和的P53部分缺失，并缺少P53蛋白表達(dá)。 細(xì)胞可以合成0.1PMOL/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合進細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強細(xì)胞熒光表達(dá)量可進行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個月，篩選時，將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中，細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可，每次篩選時間為一周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后第二代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時，可進行篩選，維持陽性細(xì)胞比例。篩選過程中，建議不要使用細(xì)胞做實驗，抗生素會影響部分實驗結(jié)果。