Alpha MEM(CellCook cat:CM2003,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:3-1:6傳代(培養(yǎng)面積比)

消化2-3分鐘

每周換液2-3次

ALPHA MEM+10%FBS+10%DMSO

OP9細(xì)胞株源自新生的OP/OP 小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個(gè)突變，它不能生成有功能的巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細(xì)胞(ES)分化成血細(xì)胞而不是其他巨噬細(xì)胞有抑制功能。 OP9細(xì)胞可以用于與小鼠胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng)以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細(xì)胞譜系的血細(xì)胞。與OP9共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復(fù)雜的胚胎結(jié)構(gòu)。這個(gè)系統(tǒng)對研究造血細(xì)胞的發(fā)育和分化的分子機(jī)理有用。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察，標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個(gè)月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。