商品詳情
【培養(yǎng)條件】
IMDM(CellCook cat:CM2011,或同配方)10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1901G)
【傳代比例】
1:3傳代(培養(yǎng)面積比);維持細胞密度在1*10^5-1*10^6cells/ml
【傳代方式】
離心收集(1000rpm,5分鐘)
【換液頻率】
每周換液2-3次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
++
【培養(yǎng)要點】
需控制細胞密度,靜置培養(yǎng)后細胞會貼附
【特征特性】
該細胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的。該細胞曾被認為來源于粒系,處于高度未分化階段;Anderson等人作了細胞膜特性的研究后,認為該細胞是紅白血病細胞系。該細胞是對自然殺傷細胞高度敏感的體外靶標(biāo),故而被廣泛應(yīng)用于這方面的研究。K562的原始細胞是一種具有多向分化潛能的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細胞,能自發(fā)分化為紅系、粒系和單核系的可辨識的祖細胞。該細胞表達CD7(25%)
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進行觀察,標(biāo)記后的細胞非常容易進行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期(一個月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。